常用的液相色譜儀檢測(cè)器有哪幾種？
2019-06-19
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液相色譜法(HPLC)是目前應(yīng)用廣泛的分離、分析、純化有機(jī)化合物(包括能通過(guò)化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)化合物的無(wú)機(jī)物)的有效方法之一。在已知的有機(jī)化合物中，約有80%能用液相色譜法分離、分析，而且由于此法條件溫和，不破壞樣品，因此液相色譜儀特別適合高沸點(diǎn)、難氣化揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差的有機(jī)化合物和生命物質(zhì)。對(duì)于液相色譜儀，檢測(cè)器是*的搭檔，在檢測(cè)各種元素物質(zhì)時(shí)，需要檢測(cè)器幫助將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào)，那么液相色譜儀常用檢測(cè)器的種類有哪些，下面我們來(lái)仔細(xì)了解一下。
一、通用型液相色譜儀檢測(cè)器
1、示差折光檢測(cè)器（RID）
示差折光檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器，只要被測(cè)組分與洗脫液的折光指數(shù)有差別就可使用。生命科學(xué)中常遇到各類糖類化合物，沒(méi)有紫外吸收，一般常用示差折光檢測(cè)器。它的通用性比UVD廣，但靈敏度要低，對(duì)溫度變化敏感，并與梯度洗脫不相容，因而限制了它的使用。
2、質(zhì)譜檢測(cè)器（MSD）
質(zhì)譜檢測(cè)器是另一種通用型檢測(cè)器，在靈敏度、選擇性、通用性及化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息的提供等方面都有突出的優(yōu)點(diǎn)。但它的昂貴操作費(fèi)用和復(fù)雜性限制了它的推廣應(yīng)用。
3、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器也是一種通用型的檢測(cè)器，可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品，而不需要樣品含有發(fā)色基團(tuán)。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比，因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢測(cè)未知物。ELSD靈敏度比RID高，對(duì)溫度變化不敏感，基線穩(wěn)定，可用于梯度洗脫?，F(xiàn)在ELSD已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測(cè)。
二、常用液相色譜儀檢測(cè)器
1、二極管陣列檢測(cè)器（PDAD）
二極管陣列檢測(cè)器是20世紀(jì)80年代才出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道檢測(cè)器，它可以看作是UVD的一個(gè)分支。在對(duì)每個(gè)洗脫組分進(jìn)行光譜掃描，經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后，得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性（確證是否是單一純物質(zhì)），色譜用于定量，常用于復(fù)雜樣品（如生物樣品、中草藥）的定性定量分析。
2、熒光檢測(cè)器（FLD）
熒光檢測(cè)器同樣屬于選擇性檢測(cè)器，其靈敏度在目前常用的HPLC檢測(cè)器中是zui高的，應(yīng)用也較多，僅次于UVD。它適用于能激發(fā)熒光的化合物。很多與生命科學(xué)有關(guān)的物質(zhì)，如氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝藥物都可以用熒光法檢測(cè)。熒光檢測(cè)器在生物樣品痕量分析中很有用，尤其在用熒光衍生后，可以檢測(cè)很微量的氨基酸和肽。
3、紫外吸收檢測(cè)器（UVD）
紫外吸收檢測(cè)器是目前HPLC中應(yīng)用zui廣泛的檢測(cè)器。它的主要特點(diǎn)是靈敏度高，線性范圍寬，對(duì)流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫。它要求被檢測(cè)樣品組分有紫外吸收，屬于選擇性檢測(cè)器。
4、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器
化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種快速、靈敏的新型檢測(cè)器，因其設(shè)備簡(jiǎn)單、價(jià)廉、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。其原理是基于某些物質(zhì)在常溫下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，生成處于激發(fā)態(tài)勢(shì)反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)物，當(dāng)它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時(shí)，就發(fā)射出光子。由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來(lái)自化學(xué)反應(yīng)，故叫作化學(xué)發(fā)光。當(dāng)分離組分從色譜柱中洗脫出來(lái)后，立即與適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合，引起化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射，其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比。
通用型檢測(cè)器可連續(xù)測(cè)量色譜柱的流出物的全部特性變化，通常采用差分測(cè)量法，這類檢測(cè)器包括示差折光檢測(cè)器、介電常數(shù)檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器等，通用檢測(cè)器適用范圍廣，但由于對(duì)流動(dòng)相有響應(yīng)，因此易受溫度變化、流動(dòng)相和組分的變化的影響，噪聲和漂移都比較大，靈敏度較低，不能用梯度洗脫。
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